https://www.proz.com/kudoz/english-to-portuguese/biology-tech-chemmicro-/337749-southern-blot.html
Jan 7, 2003 15:27
21 yrs ago
English term

Southern Blot

Non-PRO English to Portuguese Science Biology (-tech,-chem,micro-) Biology, DNA detection
Following this procedure, PCR-positive G9 strain was confirmed by Southern Blot using the 287-bp internal iap probe.
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5 +1 Southern Blot (mancha meridional)

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Southern Blot (mancha meridional)

O nome é mantido em português, Carlos. Confira:

Métodos de detecção da variabilidade genética no DNA
Southern-blot - o DNA digerido por enzimas de restrição é separado em eletroforose e transferido para uma membrana de nitrocelulose ou nylon. Posteriormente, utiliza-se de um fragmento de DNA de interesse (SONDA ou probe) marcado com radioatividade para que este revele quais fragmentos de DNA ligados à membrana são homólogos a este. Deste modo, pode-se detectar locos específicos que antes estavam misturados entre todos os fragmentos digeridos separados por ordem de tamanho. Este método produz as impressões digitais de DNA utilizadas em Testes de Identidade.

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Note added at 2003-01-07 15:56:36 (GMT)
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cafe.cbmeg.unicamp.br/protoc/southern.htm

Southern blot – preparo de membranas para hibridação





Digestão do DNA genômico




- digerir de 10-15 mg de DNA genômico com um excesso de 5x da enzima de restrição apropriada em um volume final de 300 mL (DNA genômico deve ser sempre pipetado com a ponta da ponteira cortada)



Exemplo:

H2O y mL

DNA genômico x mL (10 mg)

Tampão de enzima (10x) 25 mL

Espermidina (0,1 M) 5 mL

Enzima (10 U/mL) 5 mL

Volume final de 300 mL



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